A flúrljómun smásjá notar kvikasilfur eða xenon lampi framleiða útfjólublátt ljós. Ljósið kemur inn í smásjá og lendir á dichroic spegil - spegil sem endurspeglar einn úrval af bylgjulengdum og gerir annað svið til að fara í gegnum. The dichroic spegill endurspeglar útfjólublátt ljós upp til sýnis. The útfjólubláu ljósi ertir flúrljómun innan sameinda í sýninu. The linsa í hlutgleri safnar blómstrandi-bylgjulengd ljós framleitt. Þetta blómstrandi ljós fer í gegnum dichroic spegil og hindrun síu (sem útilokar aðra en blómstrandi bylgjulengdir), sem gerir það að augngler til að mynda myndina.
blómstrandi sameindir innan fyrirmyndinni getur annaðhvort náttúrleg eða kynnt . Til dæmis er hægt að blettur frumur með Dye heitir kalsein /AM. Af sjálfu sér, þetta Dye er ekki blómstrandi. Í AM hluta sameindarinnar sem felur hluta af kalsein sameind sem binst kalsíum, sem er blómstrandi. Þegar þú blanda kalseini /er með lausn baða frumur, Dye fer inn í frumuna. Lifandi frumur hafa ensím sem fjarlægir AM hluta, gildrur á kalseini innan frumunnar og leyfa kalseini að binda kalk þannig að það flúrljós grænt undir útfjólubláu ljósi. Dauðar frumur ekki lengur þessa ensíms. Því lifandi frumur mun fluoresce grænt, og dauðar frumur munu ekki fluoresce. Þú getur séð dauðar húðfrumur í sömu eintakið ef þú blanda í öðru Dye heitir própidíumjoðíð, sem aðeins kemst dauðar húðfrumur. Própidíumjoðíð binst DNA í kjarna og flúrljós rautt undir útfjólubláu ljósi. Þessi tvöfalda-Dye tækni er notuð í rannsóknum á eiturverkunum að ákvarða prósent af klefi íbúa sem er drepinn þegar meðhöndluð með einhverjum umhverfismálum efna, svo sem varnarefni.
Fluorescent mynd af ræktuðum rotta-heila. Lifandi frumur blettur með kalsíni (til vinstri) og dauðar frumur blettur með própidíumjoðíð (til hægri).
Mynd fengin Theresa M. Freudenrich
Fluorescent mynd af ræktuðum rotta-heila. Lifandi frumur blettur með kalsíni (til vinstri) og dauðar frumur blettur með própidíumjoðíð (til hægri).
Mynd fengin Theresa M. Freudenrich
flúrljómun-Smásjármyndir aðferðir eru gagnlegar fyrir að sjá mannvirki og mæla lífeðlisleg og lífefnafræðilegum atburðum í lifandi frumur. Ýmsar blómstrandi vísbendingar eru í boði til að læra mörg lífeðlisfræðilega mikilvæga efni, svo sem DNA, kalsíum, magnesíum, natríum, pH og ensímum. Þar að auki, mótefni sem eru sértækar fyrir ýmissa líffræðilegar sameindir á geta verið efnafræðilega bundið að flúrljómandi sameindir og not
