Fyrsta aðferðin til að búa til DNA upplýsingar voru RFLP, eða takmörkun brot lengd fjölbreytni. RFLP er ekki notað eins oft í dag vegna þess að það þarf mikið sýnishorn af DNA - eins mikið og 25 hár eða nikkel-stór blettur fyrir líkamlegan vökva - og getur tekið eins lengi og mánuði til að ljúka [Heimild: Baden]. Það krefst einnig að skoða margar hluta af DNA til að finna afbrigði, sem er tímafrekt og fer meira pláss fyrir mannleg mistök. Sumir af the stíga til RFLP greiningu eru einnig notuð í öðrum tegundum DNA profiling. Fyrir RFLP, eru leiðbeiningar:
- Aðskilja hvítt og rauð blóðkorn með skilvindu.
- Extract DNA kjarnar úr hvítum blóðkornum. Þetta er gert með því að baða frumurnar í heitu vatni, þá bæta salt og setja blönduna aftur í skilvindu [Heimild: Háskólinn í Arizona].
- Cut DNA strandar í brotum með því að nota skeriensmi.
- Settu brot í öðrum enda rúmi geli með rafskaut í það. Geli, er búið til úr agar-agar, gerð af þangi sem breytist í gelatín þegar leyst upp í sjóðandi vatni.
- Nota rafstraum til að raða DNA hluti eftir lengd. Þetta ferli er kallað agarósagels rafdrætti. Electrophoresis vísar til the aðferð í að hreyfa neikvæð-hlaðnar sameindir í gegnum hlaupi með rafmagni. Styttri hluti að færa fjær upprunalegri staðsetningu þeirra, en lengri sjálfur dvelur nær. Strikin samræma samhliða raðir.
- Notaðu lak af nítrósellulósi eða næloni að afmá DNA. The blaði er lituð þannig að mismunandi lengdir DNA hljómsveitum eru sýnilegar með berum augum. Með því að meðhöndla blað með geislun, sem autoradiograph er búin. Þetta er mynd um x-geisli kvikmynd vinstri við rotnun mynstur í geislun. The autoradiograph, með sérstakri dökk-lituðum sínum samhliða hljómsveitum, er DNA upplýsingar.
PCR (polymerase chain reaction) greining er yfirleitt fyrsta skrefið í stofnun DNA snið dag. PCR getur endurtaka lítið magn af DNA til að búa til stærra úrtak til greiningar. Það er þetta með endurtekið ferli sem tekur um fimm mínútur. Í fyrsta lagi, heat-stöðugan DNA pólýmerasa - sérstakt ensím sem binst við DNA-ið og gerir það að endurtaka - er bætt við. Næst, að DNA sýnið er hituð það til að 200 gráður F (93 gráður C) til að aðskilja enda. Þá sýnið er kælt og reheated. Upphitun tvöfaldar fjölda eintaka. Eftir þetta ferli er endurtekið um 30 sinnum, það er nóg DNA til frekari greiningar.
PCR er fyrsta skrefið í a
